Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

Позитивний результат аналізу калу на хелікобактер є достовірним доказом зараження людини. Дослідження належить до прямих видів, коли виявляється конкретний збудник чи його ДНК, а чи не наслідки його впливу чи продукти розпаду (як у проведенні імунологічних аналізів крові).

Крім того, перевагою способу є його неінвазивність – відсутність необхідності застосовувати для забору матеріалу більш-менш травматичні процедури (проколу вени для взяття крові, введення дуоденального зонда).

Проведення аналізу калу не пов'язане із присутністю пацієнта, достатньо своєчасної доставки до лабораторії випорожнень. Це особливо важливо для обстеження дітей.

Існують різні методики виявлення Helicobacter pylori, кожна має свої переваги та недоліки.

Лікар визначає необхідність і вибір способу дослідження. Значне значення має доступність аналізу для конкретного пацієнта через ціну. Більшість виконується тільки в приватних клініках і лабораторіях, оскільки вимагає дорогого обладнання.

Мета дослідження – виявлення причинного зв'язку захворювання з хелікобактером та призначення цільового курсу лікування для позбавлення від збудника.

Що являє собою хелікобактерія?

Назва Helicobacter pylori перекладається як «спіралеподібна брамникова». Воно прив'язане до характерної форми бактерії, локалізації в області воротаря (прикордонна зона шлунка із дванадцятипалою кишкою). Мікроорганізм має джгутики, що допомагають йому переміщатися навіть у густому слизу.

Хелікобактерія здатна витримувати кисле середовище шлункового соку. Для життєзабезпечення використовує енергію молекул водню, яку виробляють кишкові бактерії.

Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

Бактерія синтезує близько 20 ферментів

Найбільш відомі ферменти хелікобактер:

  • оксидаза,
  • уреаза,
  • каталаза.

До особливостей мікроорганізму належать:

  • складність виділення культуральним способом, оскільки хелікобактерія не зростає на звичайних живильних середовищах;
  • тривалий період відсутності симптоматики, що вказує на зараження;
  • можливість у «небезпечній» ситуації трансформуватися в кулясту форму та покриватися захисною плівкою.

Агресивність бактерії є основною причиною атрофічної форми хронічного гастриту з подальшим переходом у виразкову хворобу та ракову пухлину.

У калі спіралеподібну форму виявити неможливо, оскільки кишкове середовище несприятливе для існування хелікобактерії. Тут немає потрібної кислотності, мало кисню, діють сильні руйнівні ферменти жовчі, підшлункової залози. Тому в калових масах знаходиться кокова форма бактерії.

Кому рекомендується перевірити аналіз калу на хелікобактерію?

Симптоми ураження шлунка, спричинені хелікобактерією, можуть бути мінімальними або відповідати клініці загострення захворювання. У пацієнта спостерігаються:

  • здуття живота;
  • відрижка;
  • печія;
  • больовий синдром, особливо при загостреннях навесні та восени;
  • запори або проноси;
  • почуття тяжкості в епігастрії;
  • зниження апетиту;
  • різке падіння ваги.

Показаннями до дослідження можуть бути:

  • необхідність перевірки перед тривалим курсом терапії нестероїдними протизапальними ліками, інгібіторами протонної помпи, оскільки вони знижують вироблення соляної кислоти у шлунку;
  • ознаки залізодефіцитної анемії;
  • неясна тромбоцитопенія;
  • можливість зараження членів сім'ї;
  • контроль проведеного курсу антибіотикотерапії;
  • з'ясування зв'язку з генетичною схильністю.

У дитини про ознаки зараження говорять скарги на нудоту, неясні болі в животі, поганий апетит і відмова від їжі, часте рясне зригування, а також здуття і бурчання живота.

Спосіб бактеріологічного посіву

Виділення культури збудника – мікробіологічний вид дослідження. Класика способу вимагає посіву матеріалу на живильне середовище, підрахунку колоній, що виросли, дослідження мікроорганізму з колонії під мікроскопом. Також необхідно проведення біохімічних проб для вивчення його властивостей та додаткового посіву на середовище з антибіотиками для виявлення чутливості до різних препаратів.

Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

Середовище для посіву досить дороге, готується спеціально

Аналіз калу на хелікобактер пилори за допомогою культурального способу провести складно:

  • посів має проходити без доступу кисню;
  • можна виділити лише спіралеподібні форми, які рідко потрапляють у кал, а не кокові;
  • результати реакції на чутливість до антибіотиків in vitro (інвітро означає «на склі, в пробірці») на практиці виявляються оманливими і в деяких випадках не співпадають із фактичним застосуванням у пацієнта (in vivo), виявлений оптимальний антибіотик виявляється недостатньо ефективним;
  • аналіз потребує тривалого терміну (7-10 днів) для повного проведення.

З цих причин використання методу для діагностики обмежене.

Імунологічні методи дослідження

Суть імунологічного аналізу – виявлення комплексів антитіло+антиген, у якому чужорідним агентом є хелікобактерія. Найбільш звичне використання дослідження крові. Але фактично непрямі ознаки наявності антигену можна підтвердити за наявності у стільці, слині, сечі, у вагітних у навколоплідній рідині.

У методиках використовуються готові “помічені” антитіла. При обробці ними калу пацієнта, що містить антигени (залишки хелікобактерії), виникає реакція сполуки зі стандартними антитілами. Тривалість дослідження – доба. Аналіз калу на антиген хелікобактер призначається, якщо у пацієнта є будь-які симптоми порушення травлення.

Найбільш поширений варіант – первинний скринінг населення (обстеження всіх осіб, що звернулися або певних груп), що не має специфічних скарг. У Росії її не застосовується через відсутність достатньої кількості імунологічних тестів у лабораторіях поліклінік.

Метод ПЛР

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) відноситься до молекулярно-генетичної діагностики. З її допомогою виявляється не бактерія, а її специфічна ДНК. Навіть за малої кількості, у разі одужання або безсимптомного носійства метод дозволяє з достатньою точністю пов'язати зміни в організмі з дією хелікобактеру.

Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

Тривалість аналізу експрес-методом 5-6 годин, звичайним – 2-3 доби

Методика розрахована на штучний синтез окремих частин ДНК, подвоєння та побудова ланцюжка з 30 циклів. Процес немає у разі відсутності найменших залишків біоматеріалу. Для реакції необхідний прилад амплікатор. Полімераза – фермент, що прискорює процес.

ПЛР калу призначають для підтвердження ролі хелікобактерії в патології та визначення доцільності специфічної терапії:

  • при ерозіях та виразках у шлунку, стравоході та дванадцятипалій кишці;
  • шлунково-стравохідному рефлюксі (закидання вмісту у зворотному напрямку);
  • атрофічному ураженні слизової оболонки шлунка;
  • поліпах;
  • пухлинах шлунка;
  • виявлення спадкової схильності у разі наявності у родичів злоякісних пухлин органів травлення;
  • контролю над результатами терапії антибіотиками.

Перевагами ПЛР калу можна вважати:

  • високу чутливість і специфічність (відповідно визначаються 94% і 100%), реакція буває позитивною навіть за наявності 10 бактерій;
  • простоту проведення;
  • безпека для пацієнта; відсутність травматичності при заборі матеріалу;
  • можливість визначення ДНК як у спіралеподібних, так і у кокових формах хелікобактерії;
  • виділення та вивчення різних генетичних модифікацій, штамів.

Результат рідко видає хибнопозитивну інформацію за відсутності інфікованості людини.

Недоліки дослідження:

  • не надається можливість визначення оптимального антибіотика за чутливістю;
  • немає відмінностей між гострим захворюванням і залишковими явищами після загострення, ДНК бактерій залишаються в калі майже місяць після клінічного одужання;
  • чутливість все-таки нижча, ніж при дослідженні біоптату зі стінки шлунка;
  • порівняно висока вартість;
  • необхідність підготовки персоналу та придбання обладнання;
  • позитивна реакція у разі забруднення персоналом матеріалу з чужого зразка (контамінація ззовні).

Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

ПЛР-лабораторія має вдосконалену техніку, що дозволяє отримати достовірні результати діагностики

Як оцінити результати аналізів?

Розшифровка результатів дослідження – справа лікаря спеціаліста. Не варто вдаватися до самостійного трактування або користуватися послугами знайомих. Оцінка проводиться за комплексом ознак. При ПЛР видається результат:

  • негативний, а то й виділився генотип хеликобактерии, виявляється у нормі;
  • позитивний, якщо у пацієнта розпал захворювання чи зараження був у анамнезі.

При бактеріологічному дослідженні:

  • виявлено нульову кількість бактерій або хелікобактеру відсутня;
  • якщо кількість мікроорганізмів більша за нуль — підтверджується хелібактеріоз;
  • знак S означає чутливість до заявленого антибіотика;
  • R – вказує на стійкість (резистентність) до препарату;
  • I – чутливість помірна.

Бакпосів калу дозволяє дати не тільки якісну, а й кількісну характеристику хелікобактеріального зараження. Для цього враховуються ступеня зростання бактерії:

  • 1 ступінь – спостерігається слабке зростання на рідкому середовищі, на твердих зразках – зростання немає;
  • 2 ступінь – зростає до 10 колоній;
  • 3 ступінь – число колоній, що виросли, досягає 100;
  • 4 ступінь – поширеність та активність збудника дуже активні, зростає понад 100 колоній.

Останні два ступені вважаються найбільш достовірними джерелами інформації про участь хелікобактеру у патологічних змінах шлунка.

Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

Тестування проводять методом імуноферментного аналізу зі стандартними сироватками.

Імунологічні тести показують негативний результат, якщо антиген збудника не визначається, позитивний – за наявності хелікобактеріозу. Достовірність імунологічного та культурального методів значно поступається ПЛР, для їх проведення необхідна масивна поширеність збудника у фекаліях.

Як підготуватись до здачі аналізу?

Де можна здати аналіз, вкаже лікар. Він же має ознайомити пацієнта з правилами забору матеріалу та підготовки. Деякі приватні клініки видають відвідувачам надруковану інструкцію «Як складати аналізи». Від дотримання зазначених умов залежить результативність дослідження.

Загальними правилами забору фекалій на виявлення хелікобактерів є:

  • припинення прийому антибактеріальних засобів за три доби до аналізу;
  • контрольне складання аналізу калу проводять через місяць після закінчення курсу лікування;
  • деякі аналізи вимагають за три дні до дослідження перейти на дієту без продуктів із харчовою клітковиною, виключити соління, алкогольні напої;
  • заборона використання проносних препаратів, ректальних свічок, якщо лікування потребує щоденного прийому, потрібно попередити лікаря;
  • збирати кал потрібно в чистий лабораторний посуд (видається в клініці або купується в аптеці), бажано відбір проб проводити з трьох точок;
  • непридатним вважається кал із домішками слизу, гною, крові, сечі;
  • доставка матеріалу до лабораторії повинна бути забезпечена в перші 2 години, за необхідності дозволяється зберігати в холодильнику не більше доби за температури від 2 до 8 градусів.

Аналіз калу на хелікобактер пилори: як здавати на антиген, достовірність

Спеціальний набір для забору калу на аналіз можна придбати в аптеці.

Додаткові дослідження

Пацієнт при діагностиці не повинен наполягати на ізольованому дослідженні калу. Використовуючи додаткові види лікар підвищує достовірність інформації про зараження хелікобактерією.

Великої популярності користуються уреазні дихальні тести.

Проведення імунологічних досліджень сироватки крові може бути рекомендовано у разі потреби диференціальної діагностики форми ураження.

Незаперечним видом обстеження є цитологічне дослідження зразка слизової оболонки шлунка, отриманого при біопсії під час фіброгастроскопічного дослідження. При високій роздільній здатності мікроскопа лаборант бачить пофарбовану хелікобактерію.

Фіброгастроскопічна картина самої слизової оболонки з характерними ерозіями, атрофією, виразкою вказує на непрямі ознаки присутності збудника в шлунку. Рентгенологічна діагностика також дозволяє за порушеннями у напрямку складок, контурів шлунка судити про органічну патологію, викликану хелікобактерією.

За підсумками аналізів лікар може ввести пацієнта до групи ризику з підвищеною ймовірністю захворювання на виразку шлунка, злоякісними пухлинами. Попереднє застосування специфічного лікування дозволяє знизити рівень ризику. При виборі медичного закладу для виконання досліджень на платних умовах необхідно порадитись з приводу репутації та відповідальності його працівників.

EuroMD
Додати коментар